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सिंथन 3-(एंथ्रेसेन-9-इल)-2-सायनोएक्रिलोइल क्लोराइड 4 का संश्लेषण कीन गा रहा अऊर विभिन्न नाइट्रोजन न्यूक्लियोफाइल के साथे अपनी प्रतिक्रिया के माध्यम से अत्यधिक सक्रिय विषमचक्रीय यौगिकन के संश्लेषण करै के लिए उपयोग कीन गा रहा। प्रत्येक संश्लेषित विषमचक्रीय यौगिक के संरचना का स्पेक्ट्रोस्कोपिक अऊर तत्व विश्लेषण का उपयोग कइके पूरी तरह से चिन्हित कीन गा रहा। तेरह उपन्यास विषमचक्रीय यौगिकन मा से दस ने बहु-दवा-प्रतिरोधी बैक्टीरिया (एमआरएसए) के खिलाफ उत्साहजनक प्रभावकारिता दिखाई। ओनमा से, यौगिक 6, 7, 10, 13 बी अऊर 14 4 सेमी के करीब निषेध क्षेत्रन के साथ सबसे अधिक जीवाणुरोधी गतिविधि देखाइस। हालांकि, आणविक डॉकिंग अध्ययन से पता चला कि यौगिकन मा पेनिसिलिन-बाइंडिंग प्रोटीन 2 ए (पीबीपी 2 ए) के लिए अलग-अलग बाइंडिंग आत्मीयता रही, जवन एमआरएसए प्रतिरोध के लिए एक प्रमुख लक्ष्य है। सह-क्रिस्टलीकृत क्विनाजोलिनोन लिगैंड के तुलना मा 7, 10 अऊर 14 जइसन कुछ यौगिकन ने पीबीपी 2 ए के सक्रिय स्थल पर उच्च बंधन आत्मीयता अऊर परस्पर क्रिया स्थिरता देखाइस। यहिके विपरीत, यौगिक 6 अऊर 13b मा कम डॉकिंग स्कोर रहे लेकिन फिर भी महत्वपूर्ण जीवाणुरोधी गतिविधि प्रदर्शित किहिन, यौगिक 6 मा सबसे कम एमआईसी (9.7 μg/100 μL) अऊर एमबीसी (78.125 μg/100 μL) मान रहे। डॉकिंग विश्लेषण से हाइड्रोजन बॉन्डिंग अऊर π-स्टैकिंग सहित प्रमुख बातचीत का पता चला, खासकर Lys 273, Lys 316 अऊर Arg 298 जइसन अवशेषन के साथ, जेका PBP2a के क्रिस्टल संरचना मा सह-क्रिस्टलीकृत लिगैंड के साथ बातचीत के रूप मा पहचाना गा रहा। ई अवशेष पीबीपी2ए के एंजाइमी गतिविधि के लिए आवश्यक हैं। ई परिणाम बतावत हैं कि संश्लेषित यौगिक आशाजनक एंटी-एमआरएसए दवाओं के रूप मा काम कर सकत हैं, जवन प्रभावी चिकित्सीय उम्मीदवारन के पहचान करै के लिए बायोएसे के साथ आणविक डॉकिंग के संयोजन के महत्व का उजागर करत हैं।
यहि सदी के पहिले कुछ सालन मा, शोध प्रयास मुख्य रूप से आसानी से उपलब्ध शुरुआती सामग्री का उपयोग कइके रोगाणुरोधी गतिविधि के साथ कईयो अभिनव विषमचक्रीय प्रणालिन के संश्लेषण के लिए नई, सरल प्रक्रिया अऊर विधि विकसित करै पर केंद्रित रहे।
एक्रिलोनाइट्रिल अंश कईयो उल्लेखनीय विषमचक्रीय प्रणालिन के संश्लेषण के लिए महत्वपूर्ण शुरुआती सामग्री के रूप मा माना जात है काहे से कि उ अत्यधिक प्रतिक्रियाशील यौगिक हैं। यहिके अलावा, 2-सायनोएक्रिलॉयल क्लोराइड डेरिवेटिव का हाल के वर्षन मा औषधीय अनुप्रयोगन के क्षेत्र मा महत्वपूर्ण महत्व के उत्पादन के विकास अऊर संश्लेषण के लिए व्यापक रूप से उपयोग कीन जात है, जइसे कि दवा मध्यवर्ती1,2,3, एंटी-एचआईवी, एंटीवायरल, एंटीकैंसर, एंटीबैक्टीरियल, एंटीडिप्रेसेंट अऊर एंटीऑक्सीडेंट के अग्रदूत एजेंट4,5,6,7,8,9,10। हाल ही में, एंथ्रेसीन अऊर ओकरे डेरिवेटिव के जैविक प्रभावकारिता, जेहिमा ओनके एंटीबायोटिक, एंटीकैंसर11,12, एंटीबैक्टीरियल13,14,15 अऊर कीटनाशक गुण16,17 शामिल हैं, बहुत ध्यान आकर्षित किहिन हैं18,19,20,21। एक्रिलोनाइट्रिल अऊर एंथ्रेसीन अंश युक्त रोगाणुरोधी यौगिक चित्र 1 अऊर 2 मा देखावा गा है।
विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) (2021) के अनुसार, रोगाणुरोधी प्रतिरोध (एएमआर) स्वास्थ्य अऊर विकास के लिए एक वैश्विक खतरा है22,23,24,25। मरीजन का ठीक नाहीं कीन जा सकत है, जेकरे परिणामस्वरूप अस्पताल मा लंबा समय तक रहब अऊर महँगी दवाओं के जरूरत परत है, साथ ही साथ मृत्यु दर अऊर विकलांगता बढ़ जात है। प्रभावी रोगाणुरोधी दवाओं के कमी से अक्सर विभिन्न संक्रमणन के इलाज मा विफलता होत है, खासकर कीमोथेरेपी अऊर प्रमुख सर्जरी के दौरान।
विश्व स्वास्थ्य संगठन 2024 रिपोर्ट के अनुसार, मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) अऊर ई. कोलाई प्राथमिकता रोगजनकन के सूची मा शामिल हैं। दुनौ बैक्टीरिया कईयो एंटीबायोटिक दवाओं के प्रतिरोधी हैं, यहिसे उ संक्रमण का प्रतिनिधित्व करत हैं जेकर इलाज अऊर नियंत्रित करब मुश्किल है, अऊर ई समस्या का संबोधित करै के लिए नए अऊर प्रभावी रोगाणुरोधी यौगिक विकसित करै के तत्काल आवश्यकता है। एंथ्रेसीन अऊर ओकर डेरिवेटिव सुप्रसिद्ध रोगाणुरोधी हैं जवन ग्राम-पॉजिटिव अऊर ग्राम-नेगेटिव दुनौ बैक्टीरिया पर काम कर सकत हैं। यहि अध्ययन कय उद्देश्य एक नया व्युत्पन्न संश्लेषित करब है जवन स्वास्थ्य कय लिए खतरनाक इन रोगजनकन से मुकाबला कर सकत है।
विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) रिपोर्ट करत है कि कई जीवाणु रोगजनक कई एंटीबायोटिक दवाओं के प्रतिरोधी हैं, जेहिमा मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) शामिल है, जवन समुदाय अऊर स्वास्थ्य देखभाल सेटिंग्स मा संक्रमण का एक आम कारण है। एमआरएसए संक्रमण वाले मरीजन मा दवा-संवेदनशील संक्रमण वाले मरीजन के तुलना मा 64% अधिक मृत्यु दर बतावा जात है। यहिके अलावा, ई. कोलाई एक वैश्विक जोखिम पैदा करत है काहे से कि कार्बापेनेम-प्रतिरोधी एंटरोबैक्टीरियासी (यानी, ई. कोलाई) के खिलाफ रक्षा के अंतिम पंक्ति कोलिस्टिन है, लेकिन कोलिस्टिन-प्रतिरोधी बैक्टीरिया हाल ही मा कईयो देशन मा रिपोर्ट कीन गा है। 22,23,24,25
यहिसे, विश्व स्वास्थ्य संगठन ग्लोबल एक्शन प्लान ऑन एंटीमाइक्रोबियल रेजिस्टेंस26 के अनुसार, नए एंटीमाइक्रोबियल के खोज अऊर संश्लेषण के तत्काल आवश्यकता है। कईयो प्रकाशित पत्रन मा एंटीबैक्टीरियल27, एंटीफंगल28, एंटीकैंसर29 अऊर एंटीऑक्सीडेंट30 एजेंट के रूप मा एंथ्रेसीन अऊर एक्रिलोनाइट्रिल के महान क्षमता का उजागर कीन गा है। यहि संबंध मा, ई कहा जा सकत है कि ई डेरिवेटिव मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) के खिलाफ उपयोग के लिए अच्छा उम्मीदवार हैं।
पिछला साहित्य समीक्षा हमका इन कक्षाओं मा नये व्युत्पन्नन का संश्लेषित करै के लिए प्रेरित किहिन। यहिसे, वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य एंथ्रेसीन अऊर एक्रिलोनाइट्रिल अंश युक्त उपन्यास हेटरोसाइक्लिक प्रणालिन का विकसित करब, ओनके रोगाणुरोधी अऊर जीवाणुरोधी प्रभावकारिता का मूल्यांकन करब अऊर आणविक डॉकिंग द्वारा पेनिसिलिन-बाइंडिंग प्रोटीन 2 ए (पीबीपी 2 ए) के साथे ओनके संभावित बंधन बातचीत के जांच करब रहा। पिछले अध्ययनन के आधार पर, वर्तमान अध्ययन ने शक्तिशाली पीबीपी 2 ए निरोधक के साथ होनहार एंटीमेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) एजेंटन के पहचान करै के लिए हेटरोसाइक्लिक प्रणालिन के संश्लेषण, जैविक मूल्यांकन अऊर कम्प्यूटेशनल विश्लेषण जारी रखा। गतिविधि31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49.
हमार वर्तमान शोध एंथ्रेसीन अऊर एक्रिलोनाइट्रिल अंश युक्त उपन्यास विषमचक्रीय यौगिकन के संश्लेषण अऊर रोगाणुरोधी मूल्यांकन पर केंद्रित है। 3-(एंथ्रेसेन-9-इल)-2-सायनोएक्रिलोइल क्लोराइड 4 तैयार कीन गा रहा अऊर उपन्यास विषमचक्र प्रणालिन के निर्माण के लिए एक निर्माण खंड के रूप मा उपयोग कीन गा रहा।
यौगिक 4 के संरचना वर्णक्रमीय डेटा का उपयोग कइके निर्धारित कीन गा रहा। 1H-NMR स्पेक्ट्रम 9.26 ppm पर CH= के उपस्थिति देखाइस, IR स्पेक्ट्रम 1737 cm−1 पर एक कार्बोनिल समूह अऊर 2224 cm−1 पर एक सायनो समूह के उपस्थिति देखाइस, अऊर 13CNMR स्पेक्ट्रम ने प्रस्तावित संरचना के भी पुष्टि की (देखें प्रयोगात्मक खंड)।
3-(एंथ्रेसेन-9-इल)-2-सायनोएक्रिलोइल क्लोराइड 4 का संश्लेषण इथेनोलिक सोडियम हाइड्रोक्साइड घोल (10%) के साथ सुगंधित समूह 250, 41, 42, 53 के हाइड्रोलिसिस द्वारा पूरा कीन गा रहा ताकि अम्ल 354, 45, 56, फिर एक वाटर क्लोराइड के साथ उपचारित कीन गा रहा। उच्च उपज (88.5%) मा एक्रिलॉयल क्लोराइड डेरिवेटिव 4 देय के लिए स्नान, जैसा कि चित्र 3 मा देखा गा है।
अपेक्षित जीवाणुरोधी प्रभावकारिता के साथ नए विषमचक्रीय यौगिक बनावै के लिए, विभिन्न डाइन्यूक्लियोफाइल के साथ एसिल क्लोराइड 4 के प्रतिक्रिया कीन गै रही।
एसिड क्लोराइड 4 का एक घंटा के लिए 0° पर हाइड्राजिन हाइड्रेट के साथ इलाज कीन गा रहा। दुर्भाग्य से, पाइराजोलोन 5 प्राप्त नाहीं कीन गा रहा। उत्पाद एक एक्रिलामाइड व्युत्पन्न रहा जेकर संरचना वर्णक्रमीय डेटा से पुष्टि कीन गै रही। एकर आईआर स्पेक्ट्रम 1720 सेमी-1 पर सी=ओ, 2228 सेमी-1 पर सी≡एन अऊर 3424 सेमी-1 पर एनएच के अवशोषण बैंड देखाइस। 1H-NMR स्पेक्ट्रम 9.3 पीपीएम पर ओलेफिन प्रोटॉन अऊर एनएच प्रोटॉन का एक विनिमय सिंगलट सिग्नल देखाइस (देखें प्रयोगात्मक खंड)।
एसिड क्लोराइड 4 के दुई मोल का फेनिलहाइड्राजिन के एक मोल के साथ प्रतिक्रिया कीन गा रहा ताकि एन-फेनिलएक्राइलोइलहाइड्राजिन डेरिवेटिव 7 का अच्छी उपज (77%) मा प्राप्त कीन जा सके (चित्र 5)। अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी डेटा से 7 के संरचना के पुष्टि कीन गै रही, जेहिमा 1691 अऊर 1671 सेमी-1 पर दुई सी=ओ समूहन के अवशोषण, 2222 सेमी-1 पर सीएन समूह के अवशोषण अऊर 3245 सेमी-1 पर एनएच समूह के अवशोषण देखा गा रहा, अऊर एकर 1एच-एनएमआर स्पेक्ट्रम 195 सेमी-18 अऊर पीएमसीएच समूहन का देखाइस। एनएच प्रोटॉन 10.88 पीपीएम पर (देखें प्रयोगात्मक खंड)।
यहि अध्ययन मा, 1,3-डाइन्यूक्लियोफाइल के साथे एसिल क्लोराइड 4 के प्रतिक्रिया के जांच कीन गै रही। कमरा के तापमान पर आधार के रूप मा टीईए के साथ 1,4-डाइऑक्सेन मा 2-एमिनोपाइरिडीन के साथ एसिल क्लोराइड 4 का उपचार एक्रिलामाइड डेरिवेटिव 8 (चित्र 5) प्रदान किहिस, जेकर संरचना वर्णक्रमीय डेटा का उपयोग कइके पहचाना गा रहा। आईआर स्पेक्ट्रा 2222 सेमी-1 पर खिंचाव सायनो, 3148 सेमी-1 पर एनएच अऊर 1665 सेमी-1 पर कार्बोनिल के अवशोषण बैंड देखाइस; 1H एनएमआर स्पेक्ट्रा ने 9.14 पीपीएम (प्रायोगिक खंड देखौ) पर ओलेफिन प्रोटॉन के उपस्थिति के पुष्टि की।
यौगिक 4 थायोयूरिया के साथ प्रतिक्रिया करत है अऊर पाइरिमिडीनथियोन 9 देत है; यौगिक 4 थियोसेमीकार्बाजाइड के साथ प्रतिक्रिया करत है अऊर थियोपाइराजोल डेरिवेटिव 10 (चित्र 5) देत है। यौगिक 9 अऊर 10 के संरचना वर्णक्रमीय अऊर तत्व विश्लेषण (देखें प्रयोगात्मक खंड) द्वारा पुष्टि कीन गै रही।
टेट्राजिन-3-थियोल 11 का यौगिक 4 के 1,4-डाइन्यूक्लियोफाइल (चित्र 5) के रूप मा थायोकार्बाजाइड के साथ प्रतिक्रिया से तैयार कीन गा रहा, अऊर स्पेक्ट्रोस्कोपी अऊर तत्व विश्लेषण से एकर संरचना के पुष्टि कीन गै रही। अवरक्त स्पेक्ट्रम मा, सी = एन बंधन 1619 सेमी-1 पर दिखाई दिहिस। साथै साथ, एकर 1H-NMR स्पेक्ट्रम 7.78–8.66 पीपीएम पर सुगंधित प्रोटॉन अऊर 3.31 पीपीएम पर एसएच प्रोटॉन के मल्टीप्लेट संकेतन का बरकरार रखत रहा (देखें प्रयोगात्मक खंड)।
एक्रिलोइल क्लोराइड 4 1,2-डायमिनोबेंजीन, 2-एमिनोथियोफेनॉल, एंथ्रानिलिक एसिड, 1,2-डायमिनोइथेन अऊर इथेनोलामाइन के साथे 1,4-डायन्यूक्लियोफाइल के रूप मा प्रतिक्रिया करत है अऊर नया विषमचक्रीय प्रणाली बनावत है (13-16)।
इन नए संश्लेषित यौगिकन के संरचनाओं के वर्णक्रमीय अऊर तत्व विश्लेषण (देखें प्रयोगात्मक खंड) द्वारा पुष्टि कीन गै रही। 2-हाइड्रोक्सीफेनिलएक्रिलामाइड डेरिवेटिव 17 2-एमिनोफेनॉल के साथ एक डाइन्यूक्लियोफाइल (चित्र 6) के रूप मा प्रतिक्रिया से प्राप्त कीन गा रहा, अऊर एकर संरचना वर्णक्रमीय अऊर तत्व विश्लेषण से पुष्टि कीन गा रहा। यौगिक 17 के अवरक्त स्पेक्ट्रम से पता चला कि C=O अऊर C≡N संकेत क्रमशः 1681 अऊर 2226 cm−1 पर दिखाई दिहिन। यहि बीच, एकर 1H-NMR स्पेक्ट्रम 9.19 पीपीएम पर ओलेफिन प्रोटॉन के सिंगलट सिग्नल का बरकरार रखिस, अऊर ओएच प्रोटॉन 9.82 पीपीएम पर दिखाई दिहिस (देखें प्रयोगात्मक खंड)।
कमरा के तापमान पर विलायक के रूप मा डाइऑक्सेन अऊर उत्प्रेरक के रूप मा टीईए मा एक न्यूक्लियोफाइल (जैसे, एथिलामाइन, 4-टोलुइडिन अऊर 4-मेथोक्सीएनिलिन) के साथ एसिड क्लोराइड 4 के प्रतिक्रिया से हरे क्रिस्टलीय एक्रिलामाइड डेरिवेटिव 18, 19 ए अऊर 19 बी प्राप्त भए। यौगिक 18, 19a अऊर 19b के तत्व अऊर वर्णक्रमीय डेटा इन व्युत्पन्नन के संरचनाओं के पुष्टि किहिन (देखें प्रयोगात्मक खंड) (चित्र 7)।
विभिन्न सिंथेटिक यौगिकन के रोगाणुरोधी गतिविधि के जांच के बाद, अलग-अलग परिणाम प्राप्त कीन गा रहें जइसे कि तालिका 1 अऊर चित्र 8 मा देखा गा है (चित्र फ़ाइल देखौ)। सब परीक्षण कीन गा यौगिक ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया एमआरएसए के खिलाफ अलग-अलग डिग्री के निषेध देखाइस, जबकि ग्राम-नकारात्मक जीवाणु एस्चेरिचिया कोलाई सब यौगिकन के प्रति पूर्ण प्रतिरोध देखाइस। परीक्षण कीन गा यौगिकन का एमआरएसए के खिलाफ निषेध क्षेत्र के व्यास के आधार पर तीन श्रेणियन मा विभाजित कीन जा सकत है। पहली श्रेणी सबसे सक्रिय रही अऊर वहिमा पाँच यौगिक (6, 7, 10, 13b अऊर 14) शामिल रहे। इन यौगिकन के निषेध क्षेत्र का व्यास 4 सेमी के करीब रहा; यहि श्रेणी मा सबसे सक्रिय यौगिक यौगिक 6 अऊर 13b रहे। दूसर श्रेणी मध्यम रूप से सक्रिय रही अऊर वहिमा पांच अउर यौगिक (11, 13 ए, 15, 18 अऊर 19 ए) शामिल रहे। इन यौगिकन का निषेध क्षेत्र 3.3 से 3.65 सेमी तक रहा, यौगिक 11 3.65 ± 0.1 सेमी का सबसे बड़ा निषेध क्षेत्र देखावत रहा। दूसर ओर, अंतिम समूह मा तीन यौगिक (8, 17 अऊर 19 बी) रहे जेहिमा सबसे कम रोगाणुरोधी गतिविधि (3 सेमी से कम) रही। चित्र 9 विभिन्न निषेध क्षेत्रन के वितरण का देखावत है।
परीक्षण कीन गा यौगिकन के रोगाणुरोधी गतिविधि के आगे के जांच मा हर यौगिक के लिए एमआईसी अऊर एमबीसी का निर्धारण शामिल रहा। परिणाम थोड़े भिन्न रहे (जैसा कि तालिका 2, 3 अऊर चित्र 10 मा देखा गा है (चित्र फ़ाइल देखौ)), यौगिक 7, 11, 13a अऊर 15 का जाहिर तौर पर सबसे अच्छा यौगिक के रूप मा पुनर्वर्गीकृत कीन जात है। उनके पास एकै सबसे कम एमआईसी अऊर एमबीसी मान (39.06 μg/100 μL) रहे। यद्यपि यौगिक 7 अऊर 8 मा कम एमआईसी मान (9.7 μg/100 μL) रहे, लेकिन ओनके एमबीसी मान अधिक रहे (78.125 μg/100 μL)। यहिसे, ओनका पहिले बतावा गा यौगिकन के तुलना मा कमजोर माना जात रहा। हालांकि, ई छह यौगिक परीक्षण कीन गा यौगिकन मा से सबसे प्रभावी रहे, काहे से कि ओनके एमबीसी मान 100 μg/100 μL से कम रहे।
यौगिक (10, 14, 18 अऊर 19b) अन्य परीक्षण कीन गा यौगिकन के तुलना मा कम सक्रिय रहे काहे से कि ओनके एमबीसी मान 156 से 312 μg/100 μL तक रहे। दूसर ओर, यौगिक (8, 17 अऊर 19a) सबसे कम आशाजनक रहे काहे से कि ओनके पास सबसे अधिक एमबीसी मान (क्रमशः 625, 625 अऊर 1250 μg/100 μL) रहे।
अंत मा, तालिका 3 मा देखावा गा सहिष्णुता स्तर के अनुसार, परीक्षण कीन गा यौगिकन का ओनके क्रिया के तरीका के आधार पर दुई श्रेणियन मा विभाजित कीन जा सकत है: जीवाणुनाशक प्रभाव वाले यौगिक (7, 8, 10, 11, 13 ए, 15, 18, 19 बी) अऊर जीवाणुरोधी प्रभाव वाले यौगिक (6, 13 बी, 19 बी, 19 ए)। ओनमा से, यौगिक 7, 11, 13a अऊर 15 पसंद कीन जात हैं, जवन बहुत कम सांद्रता (39.06 μg/100 μL) मा हत्या गतिविधि प्रदर्शित करत हैं।
परीक्षण कीन गा तेरह यौगिकन मा से दस एंटीबायोटिक-प्रतिरोधी मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) के खिलाफ क्षमता देखाइस। यहिसे, अधिक एंटीबायोटिक-प्रतिरोधी रोगजनकों (विशेष रूप से रोगजनक ग्राम-पॉजिटिव अऊर ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया का कवर करै वाले स्थानीय आइसोलेट) अऊर रोगजनक खमीर के साथ आगे के स्क्रीनिंग के साथ-साथ ओकर सुरक्षा का आकलन करै के लिए प्रत्येक यौगिक के साइटोटॉक्सिक परीक्षण के सिफारिश कीन जात है।
मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) मा पेनिसिलिन-बाइंडिंग प्रोटीन 2 ए (पीबीपी 2 ए) के अवरोधक के रूप मा संश्लेषित यौगिकन के क्षमता का मूल्यांकन करै के लिए आणविक डॉकिंग अध्ययन करा गा रहा। पीबीपी2ए जीवाणु कोशिका भित्ति जैव संश्लेषण मा शामिल एक प्रमुख एंजाइम है, अऊर ई एंजाइम के निषेध कोशिका भित्ति के निर्माण मा हस्तक्षेप करत है, जेसे अंततः जीवाणु विघटन अऊर कोशिका मृत्यु होत है1। डॉकिंग परिणाम तालिका 4 मा सूचीबद्ध हैं अऊर पूरक डेटा फ़ाइल मा अधिक विस्तार से वर्णित हैं, अऊर परिणाम बतावत हैं कि कईयो यौगिक PBP2a के लिए मजबूत बंधन आत्मीयता प्रदर्शित करत हैं, विशेष रूप से प्रमुख सक्रिय साइट अवशेष जइसे कि Lys 273, Lys 316 अऊर Arg 298। हाइड्रोजन बंधन अऊर π-स्टैकिंग सहित बातचीत बहुत समान रहीं। सह-क्रिस्टलीकृत क्विनाजोलिनोन लिगैंड (सीसीएल), जवन शक्तिशाली अवरोधक के रूप मा इन यौगिकन के क्षमता का इंगित करत है।
आणविक डॉकिंग डेटा, अन्य कम्प्यूटेशनल पैरामीटर के साथ, दृढ़ता से सुझाव दिहिस कि पीबीपी 2 ए निषेध इन यौगिकन के देखे गए जीवाणुरोधी गतिविधि के लिए जिम्मेदार प्रमुख तंत्र रहा। डॉकिंग स्कोर अऊर रूट मीन स्क्वायर डिविएशन (आरएमएसडी) मानन ने आगे बाध्यकारी आत्मीयता अऊर स्थिरता का पता लगावा, जवन ई परिकल्पना का समर्थन करत है। जैसा कि तालिका 4 मा देखा गा है, जबकि कई यौगिकन ने अच्छा बंधन आत्मीयता देखाइस, कुछ यौगिकन (जैसे, 7, 9, 10, अऊर 14) मा सह-क्रिस्टलीकृत लिगैंड के तुलना मा उच्च डॉकिंग स्कोर रहे, जेसे पता चलत है कि ओनके पास पीबीपी 2 ए के सक्रिय साइट अवशेषन के साथ मजबूत बातचीत हो सकत है। हालांकि, सबसे जैव सक्रिय यौगिक 6 अऊर 13b ने अन्य लिगैंड के तुलना मा थोड़ा कम डॉकिंग स्कोर (क्रमशः -5.98 अऊर -5.63) देखाइस। ई बतावत है कि यद्यपि डॉकिंग स्कोर का उपयोग बाइंडिंग आत्मीयता के भविष्यवाणी करै के लिए कीन जा सकत है, अन्य कारक (जैसे, जैविक वातावरण मा लिगैंड स्थिरता अऊर आणविक बातचीत) भी जीवाणुरोधी गतिविधि का निर्धारित करै मा एक प्रमुख भूमिका निभात हैं। विशेष रूप से, सब संश्लेषित यौगिकन के आरएमएसडी मान 2 Å से नीचे रहे, ई पुष्टि करत है कि ओनके डॉकिंग मुद्रा सह-क्रिस्टलीकृत लिगैंड के बंधन संरचना के साथ संरचनात्मक रूप से सुसंगत हैं, जवन शक्तिशाली पीबीपी 2 ए अवरोधक के रूप मा ओनके क्षमता का अउर समर्थन करत है।
यद्यपि डॉकिंग स्कोर अऊर आरएमएस मान मूल्यवान भविष्यवाणियन प्रदान करत हैं, लेकिन इन डॉकिंग परिणामन अऊर रोगाणुरोधी गतिविधि के बीच सहसंबंध हमेशा पहली नज़र मा स्पष्ट नाहीं होत है। यद्यपि पीबीपी2ए निषेध रोगाणुरोधी गतिविधि का प्रभावित करै वाले एक प्रमुख कारक के रूप मा दृढ़ता से समर्थित है, कईयो अंतर बतावत हैं कि अन्य जैविक गुण भी एक महत्वपूर्ण भूमिका निभात हैं। यौगिक 6 अऊर 13b ने सबसे अधिक रोगाणुरोधी गतिविधि दिखाई, 4 सेमी के निषेध क्षेत्र व्यास अऊर सबसे कम एमआईसी (9.7 μg/100 μL) अऊर एमबीसी (78.125 μg/100 μL) मानन के साथे, यौगिक 7, 90 अऊर 14 के तुलना मा उनके कम डॉकिंग स्कोर के बावजूद, हालांकि ई सुझाव देत है कि। पीबीपी2ए निषेध रोगाणुरोधी गतिविधि मा योगदान देत है, जीवाणु वातावरण मा घुलनशीलता, जैव उपलब्धता अऊर परस्पर क्रिया गतिकी जइसन कारक भी समग्र गतिविधि का प्रभावित करत हैं। चित्र 11 ओनके डॉकिंग मुद्रा देखावत है, जवन बतावत है कि दुनौ यौगिक, अपेक्षाकृत कम बाइंडिंग स्कोर के साथ भी, अभी भी पीबीपी 2 ए के प्रमुख अवशेषन के साथ बातचीत करै में सक्षम हैं, संभावित रूप से निषेध परिसर का स्थिर करत हैं। ई उजागर करत है कि जब आणविक डॉकिंग पीबीपी 2 ए निषेध मा महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि प्रदान करत है, तौ इन यौगिकन के वास्तविक दुनिया के रोगाणुरोधी प्रभावन का पूरा तरह से समझै के लिए अन्य जैविक कारकन पर विचार कीन जाय का चाही।
पीबीपी2ए (पीडीबी आईडी: 4सीजेएन) के क्रिस्टल संरचना का उपयोग करत हुए, मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) के पेनिसिलिन-बाइंडिंग प्रोटीन 2ए (पीबीपी2ए) के साथ डॉक किए गए सबसे सक्रिय यौगिक 6 अऊर 13बी के 2डी अऊर 3डी इंटरैक्शन मैप बनावा गा रहा। ई नक्शा इन यौगिकन के परस्पर क्रिया पैटर्न के पुन: डॉक सह-क्रिस्टलीकृत क्विनाजोलिनोन लिगैंड (सीसीएल) के साथ तुलना करत हैं, जेहिमा हाइड्रोजन बंधन, π-स्टैकिंग अऊर आयनिक परस्पर क्रिया जइसन प्रमुख परस्पर क्रियाओं का उजागर कीन जात है।
यौगिक 7 के लिए एक समान पैटर्न देखा गा रहा, जेहिमा अपेक्षाकृत उच्च डॉकिंग स्कोर (-6.32) अऊर यौगिक 10 के लिए एक समान निषेध क्षेत्र व्यास (3.9 सेमी) देखा गा रहा। हालांकि, एकर एमआईसी (39.08 μg/100 μL) अऊर एमबीसी (39.06 μg/100 μL) काफी उच्च सांद्रता प्रदर्शित करै के लिए आवश्यक रहे, जवन इंगित करत है कि ई प्रदर्शित करै के लिए उच्च सांद्रता के आवश्यकता है जीवाणुरोधी प्रभाव। ई बतावत है कि यद्यपि यौगिक 7 डॉकिंग अध्ययनन मा मजबूत बाध्यकारी आत्मीयता देखाइस, लेकिन जैव उपलब्धता, सेलुलर अपटेक या अन्य भौतिक रासायनिक गुणन जइसन कारक एकर जैविक प्रभावकारिता का सीमित कर सकत हैं। यद्यपि यौगिक 7 जीवाणुनाशक गुण देखाइस, लेकिन यौगिक 6 अऊर 13 बी के तुलना मा ई जीवाणु विकास का रोकै मा कम प्रभावी रहा।
यौगिक 10 ने सबसे अधिक डॉकिंग स्कोर (-6.40) के साथ एक अधिक नाटकीय अंतर देखावा, जवन पीबीपी 2 ए के लिए मजबूत बंधन आत्मीयता का इंगित करत है। हालांकि, एकर निषेध व्यास (3.9 सेमी) का क्षेत्र यौगिक 7 के तुलनीय रहा, अऊर एकर एमबीसी (312 μg/100 μL) यौगिक 6, 7 अऊर 13b से काफी अधिक रहा, जवन कमजोर जीवाणुनाशक गतिविधि का इंगित करत है। ई बतावत है कि अच्छा डॉकिंग भविष्यवाणियन के बावजूद, यौगिक 10 जीवाणु झिल्ली के घुलनशीलता, स्थिरता या खराब पारगम्यता जइसन अन्य सीमित कारकन के कारण एमआरएसए का मारय मा कम प्रभावी रहा। ई परिणाम ई समझ का समर्थन करत हैं कि जब PBP2a निषेध जीवाणुरोधी गतिविधि मा एक प्रमुख भूमिका निभात है, तौ ई परीक्षण कीन गा यौगिकन के बीच देखे गए जैविक गतिविधि मा अंतर का पूरा तरह से समझावत नाहीं है। ई अंतर बतावत हैं कि शामिल जीवाणुरोधी तंत्रन का पूरा तरह से स्पष्ट करै के लिए आगे के प्रयोगात्मक विश्लेषण अऊर गहन जैविक मूल्यांकन के जरूरत है।
तालिका 4 अऊर पूरक डेटा फाइल मा आणविक डॉकिंग परिणाम डॉकिंग स्कोर अऊर रोगाणुरोधी गतिविधि के बीच जटिल संबंध का उजागर करत हैं। यद्यपि यौगिक 6 अऊर 13 बी मा यौगिक 7, 9, 10 अऊर 14 के तुलना मा कम डॉकिंग स्कोर होत हैं, लेकिन उ सबसे अधिक रोगाणुरोधी गतिविधि प्रदर्शित करत हैं। उनके परस्पर क्रिया मानचित्र (चित्र 11 मा देखावा गा है) बतावत हैं कि उनके कम बंधन स्कोर के बावजूद, उ अभी भी पीबीपी 2 ए के प्रमुख अवशेषन के साथ महत्वपूर्ण हाइड्रोजन बंधन अऊर π-स्टैकिंग परस्पर क्रिया बनावत हैं जवन जैविक रूप से लाभकारी तरीका से एंजाइम-अवरोधक परिसर का स्थिर कइ सकत हैं। अऊर 13b के अपेक्षाकृत कम डॉकिंग स्कोर के बावजूद, ओनके बढ़ी हुई रोगाणुरोधी गतिविधि से पता चलत है कि अवरोधक क्षमता का आकलन करत समय डॉकिंग डेटा के साथ मिलके घुलनशीलता, स्थिरता अऊर सेलुलर अपटेक जइसन अन्य गुणन पर विचार कीन जाय का चाही। ई नए यौगिकन के चिकित्सीय क्षमता का सटीक रूप से आकलन करै के लिए प्रयोगात्मक रोगाणुरोधी विश्लेषण के साथ डॉकिंग अध्ययनन का संयोजित करै के महत्व का उजागर करत है।
ई परिणाम बतावत हैं कि जब आणविक डॉकिंग बाइंडिंग आत्मीयता के भविष्यवाणी करै अऊर निषेध के संभावित तंत्रन के पहचान करै के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है, तौ रोगाणुरोधी प्रभावकारिता का निर्धारित करै के लिए अकेले भरोसा नाहीं कीन जाय का चाही। आणविक डेटा बतावत है कि पीबीपी2ए निषेध रोगाणुरोधी गतिविधि का प्रभावित करै वाला एक प्रमुख कारक है, लेकिन जैविक गतिविधि मा बदलाव बतावत है कि चिकित्सीय प्रभावकारिता का बढ़ावै के लिए अन्य भौतिक रासायनिक अऊर औषधीय गुणन का अनुकूलित कीन जाय का चाही। भविष्य के अध्ययनन का जैव उपलब्धता अऊर सेलुलर अवशोषण में सुधार करै के लिए यौगिक 7 अऊर 10 के रासायनिक संरचना का अनुकूलित करै पर ध्यान केंद्रित करै का चाही, ई सुनिश्चित करै के चाही कि मजबूत डॉकिंग बातचीत वास्तविक रोगाणुरोधी गतिविधि मा अनुवादित कीन जात है। अतिरिक्त बायोएसे अऊर संरचना-गतिविधि संबंध (एसएआर) विश्लेषण सहित आगे के अध्ययन, ई यौगिक पीबीपी 2 ए अवरोधक के रूप मा कैसे काम करत हैं अऊर अधिक प्रभावी रोगाणुरोधी एजेंट विकसित करै के लिए हमरे समझ का आगे बढ़ावै के लिए महत्वपूर्ण होइहैं।
3-(एंथ्रेसेन-9-इल)-2-सायनोएक्रिलोइल क्लोराइड 4 से संश्लेषित यौगिक रोगाणुरोधी गतिविधि के अलग-अलग डिग्री प्रदर्शित करत हैं, जेहिमा कई यौगिक मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) के महत्वपूर्ण निषेध का प्रदर्शन करत हैं। संरचना-गतिविधि संबंध (एसएआर) विश्लेषण से इन यौगिकन के रोगाणुरोधी प्रभावकारिता के अंतर्निहित प्रमुख संरचनात्मक विशेषताओं का पता चला।
एक्रिलोनाइट्रिल अऊर एंथ्रेसीन दुइनौ समूहन के उपस्थिति रोगाणुरोधी गतिविधि का बढ़ावै के लिए महत्वपूर्ण साबित भै। एक्रिलोनाइट्रिल मा अत्यधिक प्रतिक्रियाशील नाइट्राइल समूह जीवाणु प्रोटीन के साथे बातचीत के सुविधा प्रदान करै के लिए आवश्यक है, जेहिसे यौगिक के रोगाणुरोधी गुणन मा योगदान मिलत है। एक्रिलोनाइट्रिल अऊर एंथ्रेसीन दुइनौ युक्त यौगिक लगातार मजबूत रोगाणुरोधी प्रभाव देखावत हैं। एंथ्रेसीन समूह के सुगंधितता इन यौगिकन का अउर स्थिर करत है, जेसे संभावित रूप से ओनके जैविक गतिविधि बढ़ जात है।
हेटरोसाइक्लिक रिंग्स के शुरूआत से कईयो डेरिवेटिव के जीवाणुरोधी प्रभावकारिता मा काफी सुधार भा। विशेष रूप से, बेंजोथियाजोल डेरिवेटिव 13 बी अऊर एक्रिलहाइड्राजाइड डेरिवेटिव 6 ने लगभग 4 सेमी के निषेध क्षेत्र के साथ सबसे अधिक जीवाणुरोधी गतिविधि दिखाई। इन विषमचक्रीय व्युत्पन्नन ने अधिक महत्वपूर्ण जैविक प्रभाव देखावा, जेसे पता चलत है कि विषमचक्रीय संरचना जीवाणुरोधी प्रभावन मा एक प्रमुख भूमिका निभात है। इसी तरह, यौगिक 9 मा पाइरिमिडीनथियोन, यौगिक 10 मा थियोपाइराजोल अऊर यौगिक 11 मा टेट्राजिन रिंग यौगिकन के जीवाणुरोधी गुणन मा योगदान दिहिन, जेसे विषमचक्रीय संशोधन के महत्व का अउर उजागर कीन गा।
संश्लेषित यौगिकन मा, 6 अऊर 13 बी अपनी उत्कृष्ट जीवाणुरोधी गतिविधियन के लिए खड़ा रहे। यौगिक 6 कय न्यूनतम निरोधात्मक सांद्रता (एमआईसी) 9.7 μg/100 μL रहा, अऊर न्यूनतम जीवाणुनाशक सांद्रता (एमबीसी) 78.125 μg/100 μL रहा, जवन मेथिसिलिन-प्रतिरोधी स्टेफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) कय साफ़ करै कय एकर उत्कृष्ट क्षमता कय उजागर करत है। इसी तरह, यौगिक 13b मा 4 सेमी का निषेध क्षेत्र अऊर कम एमआईसी अऊर एमबीसी मान रहे, जवन एकर शक्तिशाली जीवाणुरोधी गतिविधि के पुष्टि करत है। ई परिणाम इन यौगिकन के जैव प्रभावकारिता का निर्धारित करै मा एक्रिलोहाइड्राजाइड अऊर बेंजोथियाजोल कार्यात्मक समूहन के प्रमुख भूमिकाओं का उजागर करत हैं।
यहिके विपरीत, यौगिक 7, 10 अऊर 14 3.65 से 3.9 सेमी तक के निषेध क्षेत्रन के साथ मध्यम जीवाणुरोधी गतिविधि प्रदर्शित किहिन। इन यौगिकन का बैक्टीरिया का पूरा तरह से मारय के लिए उच्च सांद्रता के आवश्यकता होत है, जइसन कि ओनके अपेक्षाकृत उच्च एमआईसी अऊर एमबीसी मान से पता चलत है। यद्यपि ई यौगिक यौगिक 6 अऊर 13 बी के तुलना मा कम सक्रिय रहे, फिर भी उइ महत्वपूर्ण जीवाणुरोधी क्षमता देखाइन, जेसे पता चलत है कि विषमचक्रीय रिंग मा एक्रिलोनाइट्रिल अऊर एंथ्रेसीन अंशों का शामिल करब ओनके जीवाणुरोधी प्रभाव मा योगदान देत है।
यौगिकन के क्रिया के अलग-अलग तरीका होत हैं, कुछ जीवाणुनाशक गुण प्रदर्शित करत हैं अऊर कुछ जीवाणुरोधी प्रभाव प्रदर्शित करत हैं। यौगिक 7, 11, 13a अऊर 15 जीवाणुनाशक हैं अऊर जीवाणुओं का पूरा तरह से मारय के लिए कम सांद्रता के आवश्यकता होत है। यहिके विपरीत, यौगिक 6, 13b अऊर 14 जीवाणुस्थिर हैं अऊर कम सांद्रता मा जीवाणु विकास का रोक सकत हैं, लेकिन बैक्टीरिया का पूरा तरह से मारय के लिए उच्च सांद्रता के आवश्यकता होत है।
कुल मिला के, संरचना-गतिविधि संबंध विश्लेषण महत्वपूर्ण जीवाणुरोधी गतिविधि प्राप्त करै के लिए एक्रिलोनाइट्रिल अऊर एंथ्रेसीन अंश अऊर विषमचक्रीय संरचनाओं का पेश करै के महत्व का उजागर करत है। ई परिणाम बतावत हैं कि इन संरचनात्मक घटकन के अनुकूलन अऊर घुलनशीलता अऊर झिल्ली पारगम्यता में सुधार करै के लिए आगे के संशोधनन के अन्वेषण से अधिक प्रभावी एंटी-एमआरएसए दवाओं के विकास होइ सकत है।
मानक प्रक्रिया (एल गोमहौरिया, मिस्र) का उपयोग कइके सब अभिकर्मक अऊर विलायक शुद्ध अऊर सुखाए गए। गलनांक गैलनकैम्प इलेक्ट्रॉनिक गलनांक उपकरण का उपयोग कइके निर्धारित कीन गा रहा अऊर सुधार के बिना रिपोर्ट कीन गा रहा। इन्फ्रारेड (आईआर) स्पेक्ट्रा (सेमी⁻1) रसायन विज्ञान विभाग, विज्ञान संकाय, ऐन शम्स विश्वविद्यालय मा एक थर्मो इलेक्ट्रॉन निकोलट आईएस 10 एफटीआईआर स्पेक्ट्रोमीटर (थर्मो फिशर साइंटिफिक, वाल्थम, एमए, यूएसए) पर पोटेशियम ब्रोमाइड (केबीआर) गोलियन का उपयोग कइके दर्ज कीन गा रहा।
1H एनएमआर स्पेक्ट्रा 300 मेगाहर्ट्ज पर एक जेमिनी एनएमआर स्पेक्ट्रोमीटर (जेमिनी मैन्युफैक्चरिंग एंड इंजीनियरिंग, एनाहेम, सीए, यूएसए) अऊर एक ब्रुकर 300 मेगाहर्ट्ज एनएमआर स्पेक्ट्रोमीटर (ब्रुकर मैन्युफैक्चरिंग एंड इंजीनियरिंग, इंक) का उपयोग कइके प्राप्त कीन गा रहा। टेट्रामेथिलसिलेन (टीएमएस) का उपयोग ड्यूटेरेटेड डाइमिथाइल सल्फोक्साइड (डीएमएसओ-डी₆) के साथ एक आंतरिक मानक के रूप मा कीन गा रहा। एनएमआर माप काहिरा विश्वविद्यालय, गीजा, मिस्र के विज्ञान संकाय मा कीन गा रहा। तत्व विश्लेषण (सीएचएन) एक पर्किन-एल्मर 2400 तत्व विश्लेषक का उपयोग कइके कीन गा रहा अऊर प्राप्त परिणाम गणना कीन गा मानन के साथ अच्छा सहमति मा हैं।
एसिड 3 (5 एमएमओएल) अऊर थियोनिल क्लोराइड (5 मिलीलीटर) का मिश्रण 65 °C पर 4 घंटा के लिए पानी के स्नान मा गरम कीन गा रहा। कम दबाव मा आसवन द्वारा अतिरिक्त थियोनिल क्लोराइड का हटावा गा रहा। परिणामी लाल ठोस एकत्र कीन गा रहा अऊर आगे के शुद्धिकरण के बिना उपयोग कीन गा रहा। गलनांक: 200-202 °C, उपज: 88.5%। आईआर (केबीआर, ν, सेमी-1): 2224 (सी≡एन), 1737 (सी=ओ)। 1एच-एनएमआर (400 मेगाहर्ट्ज, डीएमएसओ-डी6) δ (पीपीएम): 9.26 (एस, 1एच, सीएच =), 7.27-8.57 (एम, 9एच, हेटरोअरोमेटाइजेशन)। 13C एनएमआर (75 मेगाहर्ट्ज, डीएमएसओ-डी6) δ (पीपीएम): 115.11 (सी≡एन), 124.82–130.53 (सीएच एंथ्रेसीन), 155.34, 114.93 (सीएच=सी–सी=ओ), 162.22 (सी=ओ); एचआरएमएस (ईएसआई) एम/जेड [एम + एच]+: 291.73111। विश्लेषक सी18एच10सीएलएनओ (291.73) के लिए गणना कीन गा: सी, 74.11; एच, 3.46; एन, 4.80। मिला: सी, 74.41; एच, 3.34; एन, 4.66%।
0°C पर, 4 (2 mmol, 0.7 g) का निर्जल डाइऑक्सेन (20 ml) मा घुलावा गा रहा अऊर हाइड्रेज़िन हाइड्रेट (2 mmol, 0.16 ml, 80%) का बूंद-बूंद डाला गा रहा अऊर 1 घंटा तक हिलावा गा रहा। अवक्षेपित ठोस का निस्पंदन द्वारा एकत्रित कीन गा रहा अऊर यौगिक 6 पावै के लिए इथेनॉल से पुन: क्रिस्टलीकृत कीन गा रहा।
हरे क्रिस्टल, गलनांक 190-192°C, उपज 69.36%; आईआर (केबीआर) ν=3424 (एनएच), 2228 (सी≡एन), 1720 (सी=ओ), 1621 (सी=एन) सेमी−1। 1एच-एनएमआर (400 मेगाहर्ट्ज, डीएमएसओ-डी6) δ (पीपीएम): 9.3 (बीआर एस, एच, एनएच, विनिमय योग्य), 7.69-8.51 (एम, 18एच, हेटरोएरोमैटिक), 9.16 (एस, 1एच, सीएच =), 8.54 (एस, 1 एच, एच = सीएच); सी33एच21एन3ओ (475.53) के लिए गणना कीन गा मान: सी, 83.35; एच, 4.45; एन, 8.84। मिला: सी, 84.01; एच, 4.38; एन, 8.05%।
(2 एमएमओएल, 0.7 ग्राम) का 20 मिलीलीटर निर्जल डाइऑक्सेन घोल (जेहिमा ट्राइएथिलामाइन के कुछ बूंद होत हैं) मा घोलौ, फेनिलहाइड्राजिन/2-एमिनोपाइरिडीन (2 एमएमओएल) डालौ अऊर क्रमशः 1 अऊर 2 घंटा के लिए कमरा के तापमान पर हिलावा। प्रतिक्रिया मिश्रण का बर्फ या पानी मा डालौ अऊर पतला हाइड्रोक्लोरिक अम्ल से अम्लीकरण करा। अलग कीन गा ठोस का फ़िल्टर करा अऊर 7 प्राप्त करै के लिए इथेनॉल से पुन: क्रिस्टलीकृत करा अऊर 8 प्राप्त करै के लिए बेंजीन से पुन: क्रिस्टलीकृत करा।
हरे क्रिस्टल, गलनांक 160-162°C, 77% पैदावार; आईआर (केबीआर, ν, सेमी-1): 3245 (एनएच), 2222 (सी≡एन), 1691 (सी=ओ), 1671 (सी=ओ) सेमी-1। 1एच-एनएमआर (400 मेगाहर्ट्ज, डीएमएसओ-डी6): δ (पीपीएम): 10.88 (एस, 1एच, एनएच, विनिमय योग्य), 9.15 (एस, 1एच, सीएच =), 8.81 (एस, 1 एच, सीएच =), 6.78-8.58 (एम, 2 एच, हेटरोमैटिक); सी 42 एच 26 एन 4 ओ 2 (618.68) के लिए गणना कीन गा मान: सी, 81.54; एच, 4.24; एन, 9.06। मिला: सी, 81.96; एच, 3.91; एन, 8.91%।
4 (2 एमएमओएल, 0.7 ग्राम) का 20 मिलीलीटर निर्जल डाइऑक्सेन घोल (जेहिमा ट्राइएथिलामाइन के कुछ बूंद शामिल हैं) मा घुलावा गा रहा, 2-एमिनोपाइरिडीन (2 एमएमओएल, 0.25 ग्राम) जोड़ा गा रहा अऊर मिश्रण का कमरा के तापमान पर 2 घंटा तक हिलावा गा रहा। प्रतिक्रिया मिश्रण का बर्फ के पानी मा डाला गा अऊर पतला हाइड्रोक्लोरिक अम्ल से अम्लीय बनावा गा। गठित अवक्षेप का फ़िल्टर कइके बेंजीन से पुन: क्रिस्टलीकृत कीन गा रहा, जेहिसे 146-148 °C के गलनांक अऊर 82.5% के उपज के साथ 8 के हरे क्रिस्टल मिले; अवरक्त स्पेक्ट्रम (केबीआर) ν: 3148 (एनएच), 2222 (सी≡एन), 1665 (सी=ओ) सेमी−1। 1एच एनएमआर (400 मेगाहर्ट्ज, डीएमएसओ-डी6): δ (पीपीएम): 8.78 (एस, एच, एनएच, विनिमय योग्य), 9.14 (एस, 1एच, सीएच =), 7.36-8.55 (एम, 13एच, हेटरोअरोमेटाइजेशन); सी23एच15एन3ओ (348.38) के लिए गणना: सी, 79.07; एच, 4.33; एन, 12.03। मिला: सी, 78.93; एच, 3.97; एन, 12.36%।
यौगिक 4 (2 एमएमओएल, 0.7 ग्राम) का 20 मिलीलीटर सूखे डाइऑक्सेन (जेहिमा ट्राइएथिलामाइन के कुछ बूंद अऊर 2 एमएमओएल थायोयूरिया/सेमीकार्बाजाइड शामिल रहे) मा घुलावा गा रहा अऊर 2 घंटा के लिए भाटा के तहत गरम कीन गा रहा। विलायक का वैक्यूम मा वाष्पित कीन गा रहा। एक मिश्रण देय के लिए अवशेष का डाइऑक्सेन से पुन: क्रिस्टलीकृत कीन गा रहा।